(一)血清酶测定：
1)血清肌酸磷酸激酶(CPK)：CPK增高是诊断本病重要而敏感的指标，DMD可在出生后或出现临床症状之前已有增高，当病程迁延时活力逐渐下降。亦可用于检查基因携带者，阳性率为60-80%。但测定值并不和病情呈正比。一般DMD在3-8岁达高峰，以后逐渐下降，瘫痪以后明显下降甚至正常。DMD测定值常为正常值的10-100倍。BMD较DMD测定值稍低，常大于正常的5倍以上，LGMD可轻度或中度增高。FSHD仅在部分病人升高。
2)血清肌红蛋白(MB)：在本病早期及基因携带者中也多显著增高。
3)血清丙酮酸酶(PK)：也很敏感，但正常人血清PK值随年龄增长而减低，因此不同年龄组要用不同标准值，20岁以下正常男女血清PK值为119.00，20岁以上男性为84.30，女性为77.50，以上三项血清酶中CPK，PK的阳性率高于Mb，三项综合检出率为70%左右。
4)其它酶：如醛缩酶(ADL)，乳酸脱氢酶(LDH)，谷草转氨酶(GOT)，谷丙转氨酶(GPT)等，也可增高，但均非肌病的特异改变，亦不敏感，但在神经源性肌萎缩中，无假阳性现象，故能与CPK和Mb的测定起相辅相成作用。此外，血红细胞膜Na+，K+ATP酶活性降低也有助于本病的确诊。
5 )CK-MM亚型，研究指出，CK-MM亚型是反映DMD病情变化的重要指标,可根据病情的变化来判定药物的疗效。DMD患者在发病早期MM3就可轻微增高;MM3大量释放时,肌细胞大量破坏，出现3个波峰倒置;病变晚期MM2出现大量堆积使得MM2波峰最高。与CK比较，CK-MM是一个相对稳定的指标，无论患者年龄大小，病程长短及病情的轻重均表现MM3和MM2的升高从而导致MM2与MM1的比值改变。对比LGMD与DMD的肌型肌酸激酶亚型，LGMD和DMD两组亚型MM1和MM3有显著性差异，说明了两组肌病病人肌细胞的损伤程度不同。
免疫功能 ：张氏检测血清中IgA、IgM、IgG的水平，与正常比较无显著性差异，说明机体的体注解免疫功能基本正常。检测患者T淋巴细胞亚群CD4+水平显著降低，CD8+ 水平相应升高，导致 CD4+/CD8+ 比值的下降，提示细胞免疫功能低下。
(二) 尿检查：尿肌酸排出增多，肌酐减少。
(三) 肌电图：可见插入电位延长，肌松弛时出现自发电位，轻收缩时运动单位电位的平均波幅和平均进限均较正常为低，也可见短棘波多相电位，强收缩时可见病理干扰相，峰值电压小于1000μv，运动神经传导速度正常。
(四)肌活检：PMD的肌肉基本病理改变为肌纤维坏死和再生，肌膜核内移，出现肌细胞萎缩与代偿性增大相嵌分布的典型表现，并随着病情进展这种肌细胞大小差异不断增加。肥大肌细胞的横纹肌消失，光镜下呈玻璃样变;坏死肌细胞出现空泡增多，絮样变性、颗粒变性和吞噬现象。肌细胞间质内可见大量脂肪和结缔组织增生。假肥大型肌营养不良症肌活检组化检查见Dys缺失或异常。某些肢带型肌营养不良症可见Dys正常，但SG缺失或异常。通过蛋白荧光免疫，可确定相应的诊断。
(五)肌肉MRI：MRI能为PMD的诊断、疗效判断及病情随访提供客观资料,并能为临床选取准确的活检部位提供定位。
(六)肌肉彩超：陈氏对肌肉萎缩程度与肌电图和肌活检均有较好的相关性，可作为肌活检术前选定活检位置的常规检测。对DMD的诊断，病情随访和临床病理活检提供客观依据。发现DMD肌肉萎缩的顺序由臀肌-肌四头肌、肌二头肌-腓肠肌、背肌。
(七)基因检测：对DMD患者可通过9对引物或11对引物进行检测，以确定相应的基因损害.
