单纯性三尖瓣狭窄病例尚不难诊断，但在联合瓣膜病变者，三尖瓣狭窄往往易被忽视，应保持警惕。必要时进行右心导管检查。个别可疑病例，在心内手术中，经手指探查右心房可明确诊断。
鉴别诊断
右心房粘液瘤，当肿瘤阻塞瓣孔时，亦可引起三尖瓣狭窄的临床表现，但病史短，病程进展迅速，超声心动图有独特的云雾状图像，可资鉴别。
检查
根据典型杂音、右心房扩大及体循环淤血的症状和体征，一般即可做出诊断，对诊断有困难者可行右心导管检查，若三尖瓣平均跨瓣舒张压差在0.27kPa(2mmHg)以上，即可诊断为三尖瓣狭窄。应注意与右房粘液瘤、缩窄性心包炎等疾病相鉴别。
辅助检查
（一）X线检查 右心房明显扩大，下腔静脉和奇静脉扩张，但无肺动脉扩张。
（二）心电图检查 右心房肥大，Ⅱ及Ⅴ1导联P波高尖；由于多数三尖瓣狭窄患者同时合并有二尖瓣狭窄，故心电图亦常示双心房肥大。无右心室肥大的表现。
（三）超声心动图检查 三尖瓣的变化与二尖瓣狭窄时观察到的相似，M型超声心动图常显示瓣叶增厚，前叶的EF斜率减慢，舒张期与隔瓣呈矛盾运动、三尖瓣钙化和增厚；二维超声心动图对诊断三尖瓣狭窄较有帮助，其特征为舒张瓣叶呈园顶状，增厚、瓣叶活动受限。多普勒超声可估测跨瓣压力阶差。
